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  • 脉冲场凝胶电泳
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    本文格式为Word版,下载可任意编辑脉冲场凝胶电泳脉冲场凝胶电泳近年来,以脉冲场凝胶电泳Pulsedfieldgelelectrophoresis,PFGE为代表的分子生物学分型方法日渐受到青睐,其原理为通过确定的方法,直接或间接

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    脉冲场凝胶电泳,PFGE实验原理,操作步骤和注意事项,实验原理,大分子DNA,一般长度超过20kb,在某些情况下,超过40kb在电场作用下通过孔径小于分子大小的凝胶时,将会改变无规卷曲的构象,沿电场方向伸直,与电场平行从而才能通过凝胶,此时

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    脉冲场凝胶电泳报告人:吉尚雷2013-03-13一、原理 常规的电泳采用的是单一的均匀电场,DNA分子经凝胶的分子筛作用由负极移向正极。而脉冲场凝胶电泳(Pulse dfield gel electr

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    脉冲场凝胶电泳实验流程r准备样品r琼脂糖包埋的样品r常用的DNA提取方法不能得到完整的大分子量DNA。大分子量DNA很脆弱,在制备过程中容易因移液等操作造成机械剪切。将完整细胞包埋入琼脂糖后再进行裂解,去除蛋白的操作,可防止大分子量DNA的

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  • 脉冲场凝胶电泳- 医学百科

    来自医学百科 名字空间 更多 页面选项 (PFGE,Pulsed Field Gel Electrophoresis)是一种分离大分子DNA的方法。在普通的凝胶电泳中,大的DNA分子( 10kb)移动...

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  • Everlab云端实验实验方法:脉冲场凝胶电泳实验-百度经验

    发布时间:2017-06-25    

    1.脉冲电场凝胶电泳的DNA样品的制备: 为避免大分子DNA 在提取过程中断裂,细胞需在琼脂糖凝胶块中进行原位裂解,在本实验中,我们使用金黄色葡萄球菌(StapHylococcus aureus)作为例子。 1) 取100mL 对数生长期金黄色葡萄球菌细胞于4℃,5000g 离心5min。 2) 用20mL TEN 缓冲液冲洗沉淀,同样条件离心5min。之后用10mL EC...

    2.限制酶消化: 提高PFGE 的分辨率取决于100~1000kb 片段电泳结果的重复率,它与酶切关系密切,可在琼脂糖凝胶块中使用合适的内切酶消化。 1) 25μL10×反应缓冲液,30U 限制酶,加双蒸水至250μL 混匀。 2) 取一个凝胶块置其中,合适温度下温育过夜(按内切酶要求)后,用TE 缓冲液洗涤并贮存。

    3.应用PFGE 对样品DNA 进行分析: 1) 用0.5×TBE 缓冲液制备一个0.8%SeakemHGT 琼脂糖凝胶,胶的厚度尽量与样品凝胶块相符。若用Wide Minisub Cell 进行电泳的话,50mL该溶液即可。 2) 胶凝后,小心移去样品梳。将凝胶块用小刀切成与加样孔一致的大小,将样心地插入加样孔,避免产生气泡。(若样品在溶液中,以l:1 的比率与50...

    jingyan.baidu.com/article/2009...

  • 脉冲场凝胶电泳试验流程.pdf 文档全文预览

    阅读文档 8页 - 150金币 - 上传时间:2019年3月15日

    脉冲场凝胶电泳实验流程一、准备样品 1.琼脂糖包埋的样品常用的DNA提取方法不能得到完整的大分子量DNA 。大分子量DNA很脆弱,在制备过程中容易因移液等操作造成机...

    max.book118.com/html/2019/031...

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  • 脉冲场凝胶电泳的原理- 360文库

    阅读文档 11页 - 10元 - 上传时间:2018年7月25日

    脉冲场凝胶电泳的原理及相关注意事项l通常的琼脂糖凝胶电泳利用双链DNA分子在电场作用下,在凝胶中的迁移率不同而达到分离的目的,l当双链DNA分子超过一定的大小以...

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  • 脉冲场凝胶电泳(PFGE)概述- 实验方法- 丁香通

    2023年1月10日 - 脉冲场凝胶电泳(PFGE)的原理大致为: br/ 细菌包埋于琼脂块中,用适当的内切酶在原位对整个细菌染色体进行酶切,酶切片段在特定的电泳系统中通...

    www.biomart.cn/experiment/430/599/603/1...

  • PFGE(脉冲场凝胶电泳)标准操作规程(SOP) - 360文库

    阅读文档 9页 - 5元 - 上传时间:2017年12月2日

    脉冲场凝胶电泳,标准操作规程,关键词,脉冲场凝胶电泳目的,运用方法对至数的进行分子分型图谱分析,采用,脉冲场凝胶电泳分子分型识别系统,官微,进行图谱分析,系统...

    wenku.so.com/d/83bbce818126ea64ec0530c558...

  • 第二节脉冲场凝胶电泳- 豆丁网

    阅读文档 22页 - 上传时间:2013年5月16日

    先简单说一下电泳的原理:什么是电泳? --简单的说,是带电的物质在电场的作 用下向着与其所带电荷相反的电极移动的 现象。 此过程与电荷大小、电场强度、电渗等因 ...

    www.docin.com/p-653498806.html

  • 脉冲场凝胶电泳技术- 360文库

    阅读文档 42页 - 33.60元 - 上传时间:2021年11月26日

    脉冲场凝胶电泳技术生科院遗传学胡银松v脉冲场凝脉电泳 (Pulsed field gelelectrophoresis,PFGE), 是近年发展起来的一种重要的分离大分子量线性DNA分子的电泳技...

    wenku.so.com/d/1b33aa77fe2b171835f3c3e0723...

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