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脉冲场凝胶电泳- 360文库查看更多优质文档 >共10页5.0
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共31页5.0脉冲场凝胶电泳,PFGE实验原理,操作步骤和注意事项,实验原理,大分子DNA,一般长度超过20kb,在某些情况下,超过40kb在电场作用下通过孔径小于分子大小的凝胶时,将会改变无规卷曲的构象,沿电场方向伸直,与电场平行从而才能通过凝胶,此时
共17页5.0脉冲场凝胶电泳报告人:吉尚雷2013-03-13一、原理 常规的电泳采用的是单一的均匀电场,DNA分子经凝胶的分子筛作用由负极移向正极。而脉冲场凝胶电泳(Pulse dfield gel electr
共8页5.0脉冲场凝胶电泳实验流程r准备样品r琼脂糖包埋的样品r常用的DNA提取方法不能得到完整的大分子量DNA。大分子量DNA很脆弱,在制备过程中容易因移液等操作造成机械剪切。将完整细胞包埋入琼脂糖后再进行裂解,去除蛋白的操作,可防止大分子量DNA的
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脉冲场凝胶电泳- 医学百科
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www.yixue.com/脉冲场凝胶电泳
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添加扩展到浏览器添加后不再显示 Everlab云端实验实验方法:脉冲场凝胶电泳实验-百度经验
发布时间：2017-06-25
1.脉冲电场凝胶电泳的DNA样品的制备: 为避免大分子DNA 在提取过程中断裂,细胞需在琼脂糖凝胶块中进行原位裂解,在本实验中,我们使用金黄色葡萄球菌(StapHylococcus aureus)作为例子。 1) 取100mL 对数生长期金黄色葡萄球菌细胞于4℃,5000g 离心5min。 2) 用20mL TEN 缓冲液冲洗沉淀,同样条件离心5min。之后用10mL EC...
2.限制酶消化: 提高PFGE 的分辨率取决于100~1000kb 片段电泳结果的重复率,它与酶切关系密切,可在琼脂糖凝胶块中使用合适的内切酶消化。 1) 25μL10×反应缓冲液,30U 限制酶,加双蒸水至250μL 混匀。 2) 取一个凝胶块置其中,合适温度下温育过夜(按内切酶要求)后,用TE 缓冲液洗涤并贮存。
3.应用PFGE 对样品DNA 进行分析: 1) 用0.5×TBE 缓冲液制备一个0.8%SeakemHGT 琼脂糖凝胶,胶的厚度尽量与样品凝胶块相符。若用Wide Minisub Cell 进行电泳的话,50mL该溶液即可。 2) 胶凝后,小心移去样品梳。将凝胶块用小刀切成与加样孔一致的大小,将样心地插入加样孔,避免产生气泡。(若样品在溶液中,以l:1 的比率与50...
jingyan.baidu.com/article/2009...
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脉冲场凝胶电泳实验- 实验方法- 丁香通
脉冲场凝胶电泳实验的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。脉冲场凝胶电泳是在两个不同方向的电场周期性交替进行的,可分离长至5Mb的DNA分子...
www.biomart.cn/experiment/523.htm
脉冲场凝胶电泳技术简介及其在细菌分子分型中的应用(期刊) - 道客...
阅读文档 4页 - 2000积分 - 上传时间:2015年11月21日·18·中国媒介生物学及控制杂志O13年4月第4卷第期ChinJVectorBiol&Control,April013,Vo1.4,No.脉冲场凝胶电泳技术简介及其在细菌分子分型中的应用·综述·叶蕊,...
www.doc88.com/p-7774491681672.html
脉冲场凝胶电泳实验流程- 360文库
阅读文档 8页 - 10元 - 上传时间:2018年3月7日脉冲场凝胶电泳实验流程一,准备样品1,琼脂糖包埋的样品常用的DNA提取方法不能得到完整的大分子量DNA,大分子量DNA很脆弱,在制备过程中容易因移液等操作造成机械剪...
wenku.so.com/d/5b45ab2c8829cb5d4c81f3b58b4...
脉冲场凝胶电泳实验中的问题及解决方案.pdf
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脉冲场凝胶电泳的原理- 360文库
阅读文档 11页 - 10元 - 上传时间:2018年7月25日脉冲场凝胶电泳的原理及相关注意事项l通常的琼脂糖凝胶电泳利用双链DNA分子在电场作用下,在凝胶中的迁移率不同而达到分离的目的,l当双链DNA分子超过一定的大小以...
wenku.so.com/d/9839be0576e456eda6e70f38965...
脉冲场凝胶电泳- A+医学百科
(PFGE,Pulsed Field Gel Electrophoresis)是一种分离大分子DNA的方法。在普通的凝胶电泳中,大的DNA分子(>10kb)移动速度接近,很难分离形成足以区分的条带。在... 详情>>
高分子量DNA琼脂糖凝胶块制备和加工 - 大小标准物的制备 - 琼脂糖凝胶块中DNA的限制性内切酶消化 - 凝胶电泳www.a-hospital.com/w/脉冲场凝胶电...
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