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  • 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的冻存培养液;取对数生长期的细胞,去除旧培养液,用PBS清洗。去除PBS,加入适量胰蛋白酶(覆盖培养皿表面)把单层生长的细胞消化下来;离心1000rpm,5min;详情 >
    1.配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的冻存培养液;
    2.取对数生的细胞,去除旧培养液,用PBS清洗。
    3.去除PBS,加入适量胰蛋白酶(覆盖培养皿表面)把单层生长的细胞消化下来;
    1.预先配制冻存液:10 % DMSO + 90%胎牛血清,4℃冰箱保存预冷;
    2.用胰酶对细胞进行消化:倒去培养瓶中的培养基或用枪小心吸去培养板中的培养基,PBS冲洗两次,用胰酶消化细胞(尽可能温和);
    3.再次用完全培养液悬浮细胞,将预冷的冻存液加入消化完全的细胞中,用滴管轻轻吹打混匀.
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  • 细胞冻存步骤-百度经验

    发布时间:2021-03-18    点赞人数:7

    1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的冻存培养液; 2. 取对数生长期的细胞,去除旧培养液,用PBS清洗。 3. 去除PBS,加入适量胰蛋白酶(覆盖培养皿表面)把单层生长的细胞消化下来; 4. 离心1000rpm,5min; 5. 去除胰蛋白酶,加入适量配制好的冻存培养液,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,计数,调节冻存液中...

    2.细胞冻存管融化 1.将细胞冻存管取出,浸入37℃水浴锅内,轻轻晃动,注意融化,当融得只剩一个小冰块时,将细胞插入冰中。 2.加入4℃预冷的培养基,用手指轻弹悬浮细胞团。 3.250g离心10min,去除上清液,再加入培养基,轻轻悬浮。 4.尽量将细胞中的DMSO洗去,计数。

    3.在细胞冻存过程中,所结的冰晶对细胞伤害较大,所以过程一定要慢,DMSO能减少冰晶伤害。在细胞复苏过程中,要快,以减少融化对细胞的伤害,其实还是冰晶的问题。DMSO浸润的细胞非常脆弱,所以可要尽快将DMSO去除,一定要轻。 

    jingyan.baidu.com/article/27fa7326e6eb...

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  • 细胞冻存液的操作步骤-百度经验

    发布时间:2019-05-15    点赞人数:1

    1.按照常用方法悬浮细胞或贴壁细胞收集于离心管中。

    2.1000rpm-1500rpm,5min离心,弃上清液。

    3.加入适量的Serum-Free细胞冻存液于离心管中,推荐细胞冻存浓度为 1×106 - 1×107 cells/ml。缓慢混合均匀,制成细胞悬液。

    jingyan.baidu.com/article/3aed632efe34...

  • 细胞冻存步骤
     - 360文库

    5.0
    共2页

    简介:此文档是关于细胞冻存步骤 的docx文档,编号为121835824,其中主题是关于教育专区、高等教育的内容展示

    4.5
    共2页

    HessenwasrevisedinJanuary2021细胞冻存步骤一、复苏,立即投入42水浴锅中,轻微摇动。液体都融化后大概12分钟。,1200转离心5分钟。加1ml培养基把细胞完全悬浮。吸到装有培养基的10cm培养皿或培养瓶中前后左右

    5.0
    共4页

    细胞冻存、解冻方法与细胞计数江苏大学附属医院 风湿科李 晶 返回主页 一、细胞冷冻保存1.材料:生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO(Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene

    4.5
    共2页

    冻存细胞注意事项:购买的细胞经过传代后,实验时一般要求先冻存起来一些细胞一次全部用掉有些太浪费,冻存的细胞除了能够重复试验外,还能作为备用细胞,是实验室的一种资源。为了最大限度保存细胞活力,冻存细胞的时候要慢冻。由于甘油或二甲基亚砜DMSO

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  • 细胞冻存储存方式:

    将细胞放在低温环境

    细胞冻存是将细胞放在低温环境,减少细胞代谢,以便长期储存的一种技术。细胞冻存是细胞保存的主要方法之一,起到了细胞保种的作用。详情 >
    来自: 360百科
  • 细胞冻存的操作步骤_360问答

    1个回答 - 提问时间:2018年03月28日

    最佳答案: 5. 15ml离心管 6. 冻存管(1~2ml) (四)其他物品 1. 微量加样枪 2. 红血球计数板 3. 记号笔 4. 医用橡皮膏 5. 移液枪 (五)试剂 ...... 详情>>

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  • 细胞冻存步骤是什么?_360问答

    1个回答 - 回答时间:2020年3月10日

    最佳答案:塑料器皿1. 吸头2. 枪头3. 胶塞4. 移液管(10ml)5. 15ml离心管6. 冻存管(1~2ml)。其他物品1. 微量加样枪2. 红血球计数板3. 记号笔4. 医用橡皮膏5...

    wenda.so.com/q/1590176826215929

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  • 细胞冻存步骤- 360文库

    阅读文档 1页 - 12元 - 上传时间:2019年7月23日

    一,复苏1,把冻存管从液氮中取出来,立即投入42水浴锅中,轻微摇动,液体都融化后,大概1,2分钟,2,把上述细胞悬液吸到恶评EP管或离心管中,1200转离心5分钟,3,把上清液...

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